CHA 對(duì)白細(xì)胞介素 (IL)-4 誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)的影響

研究背景

1、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）是一種極具侵襲性的腦腫瘤，預(yù)后極差，患者生存期通常不超過15個(gè)月，即使經(jīng)過手術(shù)切除和常規(guī)的化療、放療，效果也不理想。

2、GBM的免疫微環(huán)境在其進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中起著關(guān)鍵作用，特別是小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的浸潤。如何通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)來抑制腫瘤生長是一個(gè)重要的研究難點(diǎn)。

3、現(xiàn)有研究表明，綠原酸（CHA）在多種惡性腫瘤中具有抗腫瘤效應(yīng)，但其具體機(jī)制尚不明確，特別是在調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化方面的作用。

研究方法

1、體外實(shí)驗(yàn)：使用LPS/IFNγ和IL-4分別誘導(dǎo)M1和M2巨噬細(xì)胞極化，檢測(cè)CHA對(duì)其極化狀態(tài)的影響。通過RT-PCR分析M1和M2標(biāo)記基因的表達(dá)變化，使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)。

2、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：在G422膠質(zhì)瘤異種移植小鼠模型中，評(píng)估CHA對(duì)腫瘤生長的抑制作用，并通過流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光染色分析腫瘤組織中M1和M2巨噬細(xì)胞的分布。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、在體外實(shí)驗(yàn)中，CHA處理顯著增加了LPS/IFNγ誘導(dǎo)的M1標(biāo)記基因（如iNOS、MHC II和CD11c）的表達(dá)，并減少了IL-4誘導(dǎo)的M2標(biāo)記基因（如Arg1和CD206）的表達(dá)。具體來說，CHA在1 μM濃度下顯著增加了Ana-1細(xì)胞中iNOS mRNA水平，并減少了Arg1 mRNA水平（P ≤ 0.05）。

2、在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，CHA處理的小鼠腫瘤重量顯著減少，腫瘤抑制率在20 mg/kg和40 mg/kg劑量組分別為30%和48%（P ≤ 0.05）。CHA處理的小鼠腫瘤組織中CD11c+ M1巨噬細(xì)胞比例增加，而CD206+ M2巨噬細(xì)胞比例減少。

結(jié)果與分析

1、CHA通過促進(jìn)STAT1信號(hào)通路激活和抑制STAT6信號(hào)通路激活來調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)。具體來說，CHA顯著增加了p(Tyr701)-STAT1和p(Ser727)-STAT1的表達(dá)，并減少了p(Tyr641)-STAT6的表達(dá)（P ≤ 0.05）。

2、在共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，CHA顯著抑制了M2巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的促增殖作用，并增強(qiáng)了M1巨噬細(xì)胞的抗腫瘤效應(yīng)。CHA處理后，U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞的形態(tài)變?yōu)榈蛲鰳訄A形。

總體結(jié)論

1、CHA通過抑制M2極化和促進(jìn)M1極化，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)，從而抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的生長。具體機(jī)制包括促進(jìn)STAT1信號(hào)通路激活和抑制STAT6信號(hào)通路激活。

2、這篇論文首次展示了CHA通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化來抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的生長，提供了新的治療思路和方法。

文獻(xiàn)鏈接